Carine na pogođenu kinesku robu porasle su s 10 na 25 posto, a Peking je obećao uzvratiti istom mjerom.
Povećane carine se neće odnositi na robu koja je napustila kineske luke prije povećanja.
Kina je izjavila da "duboko žali" zbog novog američkog koraka i da će morati poduzeti "potrebne protumjere".
Taj potez dolazi u trenutku kada visoki dužnosnici s obje strane u Washingtonu pokušavaju spasiti trgovinski sporazum.
Kinesko Ministarstvo trgovine potvrdilo je najnovije povišenje carina u SAD-u na svojoj internetskoj stranici.
"Nadamo se da će SAD i kineska strana raditi zajedno... kako bi kroz suradnju i savjetovanje riješili postojeće probleme", navodi se u priopćenju.
Kineska tržišta dionica su se malo promijenila nakon isteka roka, s indeksom Hang Seng koji je zabilježio rast od 0,6 posto, a Shanghai Composite 1,5 posto.
Tržište se uskomešalo ranije ovog tjedna nakon što je američki predsjednik Donald Trump u nedjelju označio povišenje cijena.
Carine od deset posto na kineske proizvode u vrijednosti od 200 milijardi dolara - uključujući ribu, torbe, odjeću i obuću - trebale su porasti početkom godine.
To je odgođeno kako su pregovori napredovali, ali Trump sada kaže kako razgovori idu "presporo".
